Vörösvértest morfológia, fáziskontraszt mikroszkópia

Fázis kontraszt mikroszkópia az urológiában és a nephrológiában (a vesék vizsgálata) alkalmazott diagnosztikai eljárás a hematuria és a vizelet üledék diagnosztikájában a citomorfológiai létfontosságú minták (élő sejtekkel rendelkező minta) vizsgálatára és értékelésére. Ennek a módszernek a kiemelkedő jelentősége különösen azon a lehetőségen alapul, amely a diagnosztika szempontjából releváns az eritrocita morfológia (a vörös vér sejtek), amelyek értékes információkat nyújthatnak egy esetleges hematuria (vér a vizeletben) vagy az eritrocituria (vörösvértestek a vizeletben) eredetéről. Fázis kontraszt mikroszkópia vizelet üledéke ideális a különböző formáinak értékelésére vörösvértesteket.Bevezetése fázis kontraszt mikroszkópia a rutindiagnosztikában jelentős előrelépésnek tekinthető, mivel ez megkönnyíti a patognomonikus vizeletkomponensek megkülönböztetését a nem patológiás műtermékektől. A fáziskontraszt-mikroszkópia felülmúlja a fénymezős mikroszkóppal végzett vizsgálatot, amelyet a fáziskontraszt-mikroszkópia bevezetéséig alkalmaztak a műtárgyak differenciálódása tekintetében. Ha nem egyértelmű vagy nem meggyőző megállapítás van, akkor ennek az eljárásnak az alkalmazása kevésbé hasznos intézkedéseket takaríthat meg, mint például a glomeruláris hematuria (lásd alább) radiológiai vagy cisztoszkópos diagnosztikája (cisztoszkópia), csökkentve ezzel a költségeket és megtakarítva a kezelési időt.

Jelzések (alkalmazási területek)

A fázis-kontraszt mikroszkópiát az urológiában és a nephrológiában használják az eritrocita morfológia tanulmányozására:

• A citomorfológiai vitális minták értékelése a hematuria és a vizelet üledék diagnózisában. Jelzés:> 6-8 vörösvértesteket/ l vizeletben vagy pozitív csíktesztben kimutatható. Az eritrocita morfológia összefüggésében a glomeruláris hematuria és a nem vese eritrocituria differenciálását diszmorf (glomeruláris) és eumorf vörösvértesteket.
• Glomeruláris eredetű diszmorf hematuria a membrános és membranoproliferatív glomerulonephritis, valamint IgA nephropathia, fokális és segmentális nephrosclerosis és lupus nephritis. Glomeruláris hematuria esetén az eritrociták a glomeruláris kapillárisok sérült bazális membránjain keresztül kényszerülnek, károsodást okozva. Mikroszkóposan felismerjük a diszmorf eritrocitákat, amelyeket akantocitáknak is neveznek (= vörösvértestek „Mickey egér fülekkel”).
• Eumorf hematuria (posztglomeruláris hematuria) olyan betegeknél található meg veseciszták behatolva az üreges rendszerbe, hólyag bilharzia, vér keverék a hüvelyből (hüvely), sérülés a hólyagkatéter, vér alvadási rendellenességek stb.

Az eljárás

A fáziskontraszt-mikroszkópia elve a fénysugarak interferenciáján alapszik a mikroszkóp sugárútjában, amellyel a nem festett sejtek nagy kontrasztú képe érhető el. A fáziskontraszt mikroszkóp felépítése és funkciója:

• A gyűrű alakú nyílás, a kondenzátor, a gyűrűs fázislemez és az objektív különös jelentőséggel bír a fáziskontraszt mikroszkóp funkciója szempontjából. A gyűrű alakú nyílás beillesztésével a kondenzátorba és a fázislemez beillesztésével az objektívbe a nem diffrakcionált és a diffrakcionált fénysugarak válnak szét. A diffrakciós fénysugarak hullámhosszának ebből adódó késése olyan fáziskülönbséget idéz elő, amely optikailag a vizsgált mikroszkopikus objektum szerkezeti részleteit sötétebbnek tűnik, mint a környező közeg. Fizikailag a fázis vérlemezkék konvertálja a fázis vagy út különbségeket amplitúdó különbségekké. Ezen amplitúdó-különbségek eredményeként az objektum képe megjelenik a mikroszkópban az objektumon áthaladó és a tárgynál diffrakcionált közvetlen fénysugarak kölcsönös törlésével vagy felerősítésével.
• Ennek az elvnek tehát hátránya, hogy az ideális fáziskészítmények nem a szabályok, mivel az amplitúdóhatások általában a fázishatásokra helyezkednek el.
• A struktúrák amplitúdó-különbségek szerinti leképezésének elve alapján a meglévő sejtstruktúrák a szürke színárnyalatoként vannak ábrázolva, saját optikai tulajdonságaiktól sűrűség. A szerkezetek reprodukciójának javítása, vékony készítmények és fázisok használata vérlemezkék van feltüntetve.A különböző fázisok jellegétől függően vérlemezkék, pozitív és negatív fáziskontrasztok egyaránt elérhetők, amelynek eredményeként az érdeklődési tárgyak sötétebbek vagy világosabbak, mint a környezetük.
• A fáziskontraszt mikroszkópiában azt is fontos megjegyezni elhalás (sejtek elhalása) viszonylag gyorsan bekövetkezhet a fénynek való kitettség és az életfontosságú sejtek további károsodása miatt. Ennek eredményeként ez a gyors elhalás fejlesztés során a tárgylemezek értékelését egy-két órán belül el kell végezni a érvényesség a diagnosztikai intézkedés. Így a létfontosságú minták értékelésének ez az időbeli korlátozása általában fotomikrográfiával vagy, ha szükséges, mikrokinematográfiával végez dokumentációt. A fotomikrográf egy mikroszkópos kép fényképe, amelyet egy mikroszkóphoz rögzített kamerával készítettek. A mikrokinematográfia révén lehetőség van mikroszkópos megfigyelés alatt álló tárgyak mozgóképekben történő rögzítésére.