Egyetlen-gén az elemzés egy célzott genetikai vizsgálati módszer.
Ezen eljárás keretében, ha örökletes betegség gyanúja merül fel, amelyet egyetlen változás vált ki a gén, az ok-okozati gyanújú gént vizsgálják. Ezt gyakran rutinszerűen is elvégzik a szűrővizsgálatok részeként.
Jelzések (alkalmazási területek)
- Monogén betegségek diagnosztizálása pl cisztás fibrózis.
Az eljárás
Szükséges anyag
- Heparin vér (minimum 1-2 ml)
A beteg felkészítése
- Nem szükséges
Zavaró tényezők
- Senki se tudja
A laboratóriumi módszer
Leggyakrabban az egyszeresgén Az elemzés a Sanger-módszer, más néven láncterminációs szintézis, ahol először a DNS izolálásáról van szó vér. Aztán minden hidrogén megszakadnak azok a kötések, amelyek a kétszálú DNS összetartását szolgálják. Egy percig tartó 94-96 ° C-os melegítés után két szál van jelen. Ezután következik az úgynevezett primer hibridizáció, amelynek során egy primer kapcsolódik. Ez körülbelül 60 ° C-on megy végbe. A primer egy oligonukleotid (néhány nukleotidból álló oligomerek), amely kiindulópontként szolgál a DNS-replikációhoz. enzimek mint például a DNS-polimeráz. A primer hibridizáció után kiterjesztés történik, amelynek során a hőmérsékletet 72 ° C-ra emeljük. Ez lehetővé teszi az alapozónak a DNS-polimerázhoz (enzimek amelyek szintetizálják a DNS-t). Átlagosan 30 ciklus után az eljárás leállítható.
További elemzést az hajszálcsöves elektroforézis automatizált szekvenszerekben. Az eredményt elektroferogramnak nevezzük. Ez az alapsorrendet jelző különböző színeket mutatja.
Ezzel a módszerrel mutációk detektálhatók egy génben csak egyetlen nukleáris bázissal, más néven pontmutációk.
